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              產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

              首頁(yè)>產(chǎn)品中心>>鼎國(guó)昌盛>NEP062鼎國(guó)自產(chǎn) 動(dòng)物組織 DNA 提取試劑盒
              鼎國(guó)自產(chǎn) 動(dòng)物組織 DNA 提取試劑盒

              簡(jiǎn)要描述:

              本試劑盒采用自主研發(fā)的*裂解液和酶相結(jié)合的方法裂解材料,具有效率高、性能穩(wěn)定、重復(fù)性高、速度快等特點(diǎn)。材料被裂解并、經(jīng)蛋白酶K消化后,DNA在高鹽低pH的條件下,與硅基質(zhì)膜特異性結(jié)合,在低鹽高pH值條件下,吸附的DNA被洗脫下來(lái)。本試劑盒適用于各種動(dòng)物組織、動(dòng)物細(xì)胞和血液基因組DNA的提取。提取的基因組DNA可以直接用作PCR模板、酶切、雜交等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

              更新時(shí)間:2024-06-12

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              鼎國(guó)自產(chǎn) 動(dòng)物組織 / 細(xì)胞 / 血液基因組 DNA 提取試劑盒 ;350元 

              純化效果檢測(cè)

              取2-5μl得到的DNA產(chǎn)物,0.7%agarose電泳檢測(cè)DNA分子的完整性和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度和純度。
              DNA在260nm處有吸收峰,檢測(cè)時(shí)應(yīng)該使OD260值在0.1到1.0之間數(shù)值較準(zhǔn)確。
              OD260為1時(shí)大概相當(dāng)于50μg/ml雙鏈DNA,40μg/ml單鏈DNA。
              核酸濃度(μg/ml)=OD260×50×稀釋倍數(shù)。
              OD260/OD280的值應(yīng)該為1.7~2.0。
              常見(jiàn)問(wèn)題分析:

               常見(jiàn)問(wèn)題可能原因建議
              柱子堵塞裂解消化不充分適當(dāng)延長(zhǎng)Proteinase K消化時(shí)間。
              樣品過(guò)多樣品量不要超過(guò)說(shuō)明書(shū)所定zui大量;可適當(dāng)增加Proteinase K的用量
              DNA產(chǎn)量低將沉淀倒入柱子導(dǎo)致柱子堵塞加大轉(zhuǎn)速和延長(zhǎng)離心時(shí)間
              Wash buffer A、Wash buffer B沒(méi)有加無(wú)水乙醇按說(shuō)明書(shū)加入無(wú)水乙醇
              洗脫效率低洗脫液使用前于55-65℃預(yù)熱;洗脫液pH值不合適,應(yīng)保證在7.5~8.5
              樣品裂解不*適當(dāng)延長(zhǎng)裂解時(shí)間。
              樣品不夠新鮮盡量使用新鮮樣品
              DNA純度低消化不*樣品量不要超過(guò)規(guī)定范圍;延長(zhǎng)消化時(shí)間,使樣品充分消化
              洗滌不當(dāng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)步驟洗脫
              乙醇未除干凈適當(dāng)延長(zhǎng)晾干時(shí)間,使乙醇充分揮發(fā)

              產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
              本試劑盒采用自主研發(fā)的*裂解液和酶相結(jié)合的方法裂解材料,具有效率高、性能穩(wěn)定、
              重復(fù)性高、速度快等特點(diǎn)。材料被裂解并、經(jīng)蛋白酶K消化后,DNA在高鹽低pH的條件下,
              與硅基質(zhì)膜特異性結(jié)合,在低鹽高pH值條件下,吸附的DNA被洗脫下來(lái)。
              本試劑盒適用于各種動(dòng)物組織、動(dòng)物細(xì)胞和血液基因組DNA的提取。
              提取的基因組DNA可以直接用作PCR模板、酶切、雜交等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
              組成:
               

              成分50注意事項(xiàng)
              RNase A0.5 ml-20℃保存
              Proteinase K0.5 ml-20℃保存
              Lysis Buffer A35 ml室溫低時(shí)可能有白色沉淀產(chǎn)生,加熱溶解即可
              Lysis Buffer B25 ml 
              Wash buffer A27 ml用前加入18 ml 無(wú)水乙醇,充分混勻
              Wash buffer B16 ml用前加入64 ml無(wú)水乙醇,充分混勻
              Elution Buffer10 ml 
              離心柱50個(gè)單個(gè)zui大吸附量20 μg
              紅細(xì)胞裂解液50ml4℃


               

               

               

               

               

               

               

               

              可選試劑

              編號(hào)品名規(guī)格價(jià)格
              NEP033紅細(xì)胞裂解液100ml40.00


               實(shí)驗(yàn)前試劑準(zhǔn)備

               Wash buffer A中加入18 ml 無(wú)水乙醇,充分混勻。
               Wash buffer B中加入64 ml無(wú)水乙醇,充分混勻。
               儲(chǔ)存條件:  請(qǐng)按照上表中注意事項(xiàng)的條件保存,其他未說(shuō)明的可常溫或4度保存。
               步驟:
               1、樣品處理
               全血:取50-300 μl全血,加入3倍體積的紅細(xì)胞裂解液,震蕩混勻,12000rpm離心1min,
               去上清。加入600 μl Lysis Buffer A,震蕩混勻。
               禽血:加入10-100 μl禽血,直接加入600 μl Lysis Buffer A,顛倒混勻。
               動(dòng)物組織:取20-50mg動(dòng)物組織,液氮研磨或勻漿,加入100 μl PBS重懸樣品,
               然后加入到準(zhǔn)備好的600 μl Lysis Buffer A,振蕩混勻。
               動(dòng)物細(xì)胞:離心收集105-106個(gè)培養(yǎng)細(xì)胞,加入100 μl PBS重懸細(xì)胞,
               加入600 μl Lysis Buffer A,震蕩混勻。
               2、 加入10 μl Proteinase K,60 ℃水浴20 min~40 min,其間顛倒混勻數(shù)次。
               如需消化RNA,可待樣品裂解*后加入10 μl RNase A,混勻,室溫放置10 min
                若加入樣品較多,可適當(dāng)延長(zhǎng)水浴時(shí)間,適量增加Proteinase K的量,按比例增加
                
              Lysis Buffer ALysis Buffer B量。

               3、 加入400 μl Lysis Buffer B,漩渦震蕩30 s。
               4、 12,000 rpm離心5 min,將上清轉(zhuǎn)入離心柱中,靜置2 min。

              上清可能出現(xiàn)少量白色漂浮物,此為未消化*的細(xì)胞和蛋白質(zhì)。

               5、 12,000 rpm離心1 min,棄廢液。
               6、 加入700 μl Wash buffer A(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇),12,000 rpm離心  1min,棄廢液。
               7、 加入700 μl Wash buffer B(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇), 12,000 rpm離  心  1min,棄廢液。
               8、 加入500 μl Wash buffer B,12,000 rpm離心1 min,棄廢液。
               9、 再次12,000 rpm離心2 min,將離心柱置于新的離心管中,并打開(kāi)離心柱蓋,于室溫或37 ℃恒  溫箱放置5~10min,
               直至無(wú)明顯乙醇味。
               10、在硅基質(zhì)膜中央加入50~200 μl Elution Buffer或雙蒸水(事先預(yù)熱55~65 ℃),置于室  溫2  min,12,000 rpm離2 min。
               所得液體即為基因組DNA溶液。

               

               

               

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